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        2D雙向凝膠電泳與質譜分析

        作者:小編 更新時間:2022-05-07 點擊數:

          雙向凝膠電泳是將不同種類的蛋白質按照等電點和分子量差異進行高分辨率分離的分析方法。成功的二維電泳可以將2000到3000種蛋白質進行分離,是目前唯一的同時能分離和展示的方法,在蛋白質組學中發揮重要的作用。


                通過對蛋白質雙向電泳的圖譜掃描,用相關軟件(PDQUEST等)進行圖譜差異分析,找到差別點。然后把差別點切出,進行脫色、酶解。最后樣品進入質譜測試,得到質譜原始數據文件。通過搜庫可得到差別點蛋白質的詳細信息。先將蛋白質根據其等電點在pH梯度膠內進行等電聚焦,然后按照它們的相對分子量大小進行SDS聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)第二次電泳分離。電泳后對凝膠進行染色,并用相關軟件對圖像進行分析處理。


         



        1、待檢測蛋白要求:完整無明顯降解的總蛋白,蛋白量最低5mg,濃度最低為4ug/ul,蛋白提取試劑要求:使用普通的組織、細胞裂解液即可,切忌不要使用二維電泳試劑提??;

        2、直接提供組織或細胞,細胞樣品,細胞量>108;組織樣品,植物鮮嫩組織、動物、微生物組織濕重>300mg;體液樣品,血液體積>1ml;后續操作全部由天科生物來做,您只需要提供樣本,其他試劑都無需提供。

        3、蛋白運輸:24小時內可以4度運輸;

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